Bioķīmisko pārbaužu veidi, kādi tie ir, un nozīme

The bioķīmiskie testi mikrobioloģijā tie ir ķīmisko testu kopums, ko veic paraugā esošajiem mikroorganismiem, lai tos identificētu; Šie mikroorganismi parasti ir baktērijas. Mikrobiologam ir pieejams liels skaits bioķīmisko testu.

Tomēr šo testu izvēle balstās uz provizoriskiem konstatējumiem, piemēram, Grama traipu rakstu un augšanas rakstzīmēm, kas ļauj baktērijām piešķirt noteiktu kategoriju. Biochemiskie testi galvenokārt balstās uz katra veida baktēriju vielmaiņas īpašībām. 

Ne visām baktērijām piemīt tādas pašas īpašības, tāpēc tās tiek pētītas, ja tām ir kāds konkrēts enzīms, pievienojot substrātu un gaidot reakciju. Parasti šo noteikšanu nosaka, mainot krāsu vai pH barotnē.

Baktērijas drošai identificēšanai līdz sugas līmenim bieži vien ir nepieciešami mazāk nekā 15 bioķīmiskie testi. Vairāku bioķīmisko testu veikšana var palielināt uzticību identifikācijai.

Lielākā daļa šo bioķīmisko testu tiek veikti serumā vai asins plazmā. Tomēr tos var veikt arī citos bioloģiskos izdalījumos, piemēram, urīnā, cerebrospinālajā šķidrumā, pleiras šķidrumā un izkārnījumos..

Indekss

• 1 Klasifikācija
  • 1.1 Universāls
  • 1.2 Diferenciāli
  • 1.3
• 2 Bioķīmisko testu veidi
  • 2.1. Katalāzes tests
  • 2.2 Oksidāzes tests
  • 2.3 Sālīta mannīta agara (MSA) tests
  • 2.4 Koagulāzes tests
  • 2.5 Ureāzes tests
• 3 Kādi ir bioķīmiskie testi??
• 4 Nozīme
• 5 Atsauces

Klasifikācija

Biochemiskos testus var iedalīt 3 grupās:

Universāls

Tie ir testi, kurus var veikt ar jebkuru paraugu un kas mikrobiologu vada šādos bioķīmiskos testos, kas jāveic, lai iegūtu ticamu identifikāciju..

Piemērs

Katalāzes un oksidāzes tests.

Diferenciāli

Tie ir testi, kas tiek veikti, lai identificētu paraugā esošos mikroorganismus līdz sugas līmenim.

Identifikācija tiek veikta, pamatojoties uz testu kombinācijas rezultātiem, jo ​​individuālie rezultāti nav pietiekami informatīvi, lai identificētu.

Piemērs

IMViC testi un cukura izmantošanas testi.

Īpašs

Tie ir specifiski testi attiecībā uz konkrētu sugu kopumu vai sugas apakštipu. Šie testi parasti tiek veikti, lai apstiprinātu vai identificētu apakšsugu līmenī. Atsevišķi testi ir paši informatīvi.

Piemērs

Γ-glutamilaminopeptidāzes tests.

Bioķīmisko testu veidi

Katalāzes tests

Katalāzes tests ir tests, lai pierādītu katalāzes enzīma klātbūtni, sadalot ūdeņraža peroksīdu skābeklī un ūdenī. Neliels daudzums baktēriju tiek pievienots pilienam ūdeņraža peroksīda (3%) uz slaida.

Katalāzes tests ir vienkāršs tests, ko izmanto mikrobiologi, lai palīdzētu identificēt baktēriju sugas un noteikt dažu mikrobu spēju noārdīt ūdeņraža peroksīdu, ražojot katalāzes fermentu..

Ja tiek novēroti skābekļa burbuļi, tas nozīmē, ka baktērijai ir katalāzes enzīms, jo tas katalizē ūdeņraža peroksīda sadalīšanos skābeklī un ūdenī. Tad tiek teikts, ka organisms ir katalāzes pozitīvs (piemēram: Staphylococcus aureus).

Oksidāzes tests

Šo testu izmanto, lai identificētu mikroorganismus, kas satur citohroma oksidāzi (svarīgi elektronu transportēšanas ķēdē). To parasti izmanto, lai nošķirtu ģimenes Enterobacteriaceae un Pseudomadaceae.

Citohroma oksidāze nodod elektronus no elektronu transportēšanas ķēdes uz skābekli (galīgais elektronu akceptors) un samazina to uz ūdeni. Oksidāzes testi nodrošina mākslīgās elektronu donoru un akceptoru molekulas.

Kad elektronu donoru oksidē citohroma oksidāze, barotne kļūst tumši violeta un tiek uzskatīta par pozitīvu rezultātu. Mikroorganisms Pseudomonas aeruginosa ir pozitīvas oksidāzes baktērijas piemērs.

Sālīts mannīta agara tests (MSA)

Šis tests ir gan selektīvs, gan diferencēts. MSA izvēlēsies organismus, kas spēj dzīvot vidē ar augstu sāls koncentrāciju, piemēram, Staphylococcus atšķirībā no sugas. \ t Streptokoku, kuru augšana šajos apstākļos ir inhibēta.

Diferenciālais komponents šajā testā ir cukura mannīts. Organismi, kas spēj izmantot mannītu kā pārtikas avotu, radīs fermentācijas blakusproduktus, kas ir skābi un tādējādi samazinās barotnes pH..

Vidēja skābuma dēļ pH indikators, fenolsarkans, kļūst dzeltens. Baktēriju sugu piemēri, ko var diferencēt ar šo metodi, ir šādi: Staphylococcus aureus (pozitīvs, jo tas fermentē mannītu) un Staphylococcus epidermidis (negatīvs, jo mannīts nenotiek).

Koagulāzes tests

Koagulāze ir enzīms, kas palīdz asins plazmā. Šis tests tiek veikts ar pozitīvām gram-pozitīvām un katalāzes pozitīvām baktērijām, lai noteiktu Staphylococcus aureus (pozitīva koagulāze) Faktiski koagulāze ir šīs baktēriju sugas virulences faktors.

Vīrusu veidošanās ap šo baktēriju izraisītu infekciju, iespējams, to pasargā no fagocitozes. Šis tests ir ļoti noderīgs, ja vēlaties atšķirt Staphylococcus aureus citu sugu sugas. \ t Staphylococcus kas ir negatīva koagulāze.

Ureāzes tests

Šo testu izmanto, lai identificētu baktērijas, kas spēj hidrolizēt urīnvielu, izmantojot enzīmu ureazi. To parasti izmanto, lai atšķirtu dzimumu Proteus baktēriju klātbūtne.

Karbamīda hidrolīze ražo amonjaku kā vienu no tā produktiem. Šī vājā bāze palielina barotnes pH virs 8,4 un pH indikators (fenola sarkans) mainās no dzeltenas uz rozā. Pozitīva urāzes baktērija ir Proteus mirabilis.

Kādi ir bioķīmiskie testi??

Mikrobioloģisko slimību diagnosticēšanai un to apkarošanai izmantoto ārstēšanas metožu diagnosticēšanai tiek izmantoti mikrobioloģijas testi. Turklāt tos izmanto infekcijas slimību skrīningam un to prognozēšanai..

Mikroorganismu bioķīmiskā identifikācija sniedz priekšstatu par to, ko šie mikroorganismi spēj izdarīt, jo ir iespējams diskriminēt dažādus viena un tā paša suga celmus ar specifiskiem bioķīmiskiem profiliem..

Atšķirības specifiskās fermentu aktivitātēs informē par mikroorganisma ekoloģiju, fizioloģiju vai dabisko dzīvotni, kas dažos gadījumos var tikt uzskatīta par svarīgu informāciju.

Nozīme

Strukturālās atšķirības attiecībā uz baktēriju formu, lielumu un izvietojumu palīdz identificēšanas procesā ļoti maz, jo ir daudzas baktēriju sugas, kurām ir līdzīga forma, izmērs un izvietojums..

Šā iemesla dēļ galu galā baktēriju identifikācija galvenokārt balstās uz to bioķīmisko aktivitāšu atšķirībām.

Katrai baktēriju sugai ir precīzi noteikts metabolisko aktivitāšu kopums, kas atšķiras no visām pārējām sugām. Šie bioķīmiskie "pirkstu nospiedumi" ir īpašības, ko kontrolē baktēriju fermenti.

Tādējādi bioķīmiskie testi ir svarīgi, jo tie palīdz pētniekam pareizi identificēt paraugā esošos patogēnus un tādā veidā var ieteikt pacientam atbilstošu ārstēšanu..

Atsauces

1. Beckets, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Klīniskā bioķīmija (8. izdevums). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P. H., un Cowan, S. T. (1952). Bioķīmiskās metodes bakterioloģijai. Vispārējās mikrobioloģijas žurnāls, 6(1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Klīniskā bioķīmija (5. izdevums). Elsevier Health Sciences.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Mikrobioloģijas praktiskā rokasgrāmata (2. izdevums). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Laboratorijas metodes pārtikas mikrobioloģijā (3. izdevums). Academic Press.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktiskā mikrobioloģija. BI Publikācijas Pvt Ltd.