Vogel-Johnson Agar pamati, sagatavošana un izmantošana

The Vogel-Johnson agars ir cieta, selektīva un diferenciāla barotne, kas īpaši izstrādāta, lai izolētu Staphylococcus aureus. Šo barotni Vogels un Džonsons izveidoja 1960. gadā no glicīna telurīta agara modificēšanas, ko 1955. gadā formulēja Zebovics, Evanss un Nivens..

Modifikācija ietvēra mannīta koncentrācijas palielināšanu vidē un pH indikatora iekļaušanu. Pašreizējā formula sastāv no tripteīna, rauga ekstrakta, mannīta, dikālija fosfāta, litija hlorīda, glicīna, fenola sarkana, agara, 1% kālija Tellurīta šķīduma un ūdens..

Jāatzīmē, ka ir arī citi līdzekļi, kas, tāpat kā Vogel-Johnson agars, ir selektīvi, lai izolētu S. aureus, piemēram, sālīta mannīta agara un Baird Parker agara. Šajā ziņā var teikt, ka Vogel-Johnson agara pamats ir maisījums starp sāļo mannīta agaru un Baird Parker agaru..

Pirmajā. \ T S. aureus Tos izceļ, fermentējot mannītu un pagriežot pH indikatoru dzeltenā krāsā. No otras puses, otrajā S. aureus to raksturo tellura samazināšana līdz tellūram un pelēkās vai melnās koloniju veidošanās. Abas īpašības ir novērotas Vogel-Johnson agarā.

Šis informācijas nesējs, tāpat kā tā kolēģi, ir noderīgs, lai atklātu Staphylococcus aureus pārtikas paraugos, rūpniecisko produktu sanitārajās pārbaudēs un klīniskajos paraugos.

Indekss

• 1 Fonds
  • 1.1. Barības vielu ieguldījums
  • 1.2. Selektīvā jauda
  • 1.3 Diferenciālā jauda
  • 1.4 Osmotiskā līdzsvara un sacietēšanas līdzeklis
• 2 Sagatavošana
  • 2,1 1% w / v kālija tellurīta šķīdums
  • 2.2 Vogel-Johnson agara bāzes barotne
• 3 Lietošana
• 4 Kvalitātes kontrole
• 5 Atsauces

Fonds

Barības vielu ieguldījums

Vogel-Johnson vidē ir tripteīna un rauga ekstrakts; abas vielas nodrošina garas ķēdes aminoskābes, kas kalpo kā oglekļa un slāpekļa avoti, kas nepieciešami baktēriju augšanai. Baktērijas, kas spēj augt šajā barotnē, uztvers šīs vielas.

Selektīvā jauda

Vogel-Johnson agars spēj kavēt gramnegatīvu baktēriju un pat dažu grampozitīvu baktēriju augšanu, veicinot koagulāzes pozitīvo stafilokoku attīstību. Slāpējošās vielas ir kālija tellurs, litija hlorīds un glicīns.

Diferenciālā jauda

Vielas, kas padara šo diferenciālo vidi, ir mannīts un kālija tellurs. Manitols ir ogļhidrāts, un, kad tas ir fermentēts, tiek ražotas skābes, kas maina vidi no sarkanas līdz dzeltenai, kas notiek, pateicoties fenola sarkanā pH indikatoram.

Kaut arī bezkrāsains tellurs, kad to samazina līdz metālam brīvam tellurīdam, ir tumši pelēks vai melns.

The Staphylococcus aureus mannītu un samazina tellurītu uz tellūru. Tieši tāpēc tipiskās S. aureus šajā vidē tās ir pelēkas vai melnas, ko ieskauj dzeltena vide.

Baktērijas, kas aug šajā vidē un nesamazina telurītu vai fermentācijas mannītu, veidos caurspīdīgas kolonijas, ko ieskauj sarkanā vide, vēl intensīvāka nekā sākotnējā krāsa, sakarā ar barotnes sārmaināšanos ar peptonu palīdzību..

No otras puses, baktērijas, kas samazina telurītu, bet nekartē mannītu, pieaugs kā pelēkas vai melnas kolonijas, ko ieskauj dziļi sarkana krāsa.

Ja barotne tika pagatavota bez kālija telurīta pievienošanas,. \ T S. aureus tie attīstītos kā dzeltenas kolonijas, ko ieskauj dzeltena barotne, piemēram, sāļā mannīta agārā.

Osmotiskais līdzsvars un cietinātājs

Dikālija fosfāts saglabā barotnes osmotisko līdzsvaru un pielāgo pH neitralitātei 7.2. Kamēr agars nodrošina stabilu konsistenci barotnē.

Sagatavošana

1% kālija tellurīta šķīdums w / v

Šis šķīdums nav iekļauts dehidrētā vidē, jo to nevar sterilizēt autoklāvā. Šī iemesla dēļ to sagatavo atsevišķi un pievieno sterilizētam vidē.

Dažas komerciālas mājas pārdod gatavu 1% kālija tellurīta šķīdumu. Ja vēlaties sagatavoties laboratorijā, rīkojieties šādi:

Nosver 1,0 g kālija tellurīta un izmēra 100 ml destilēta ūdens. Kālija tellurītu izšķīdina ūdens daļā un tad piepilda ūdens daudzumu līdz 100 ml. Šķīdumu sterilizē ar filtrēšanas metodi.

Vogel-Johnson agara bāzes barotne

Nosver 60 g dehidrētas vides un izšķīdina 1 litrā destilēta ūdens. Maisījumu karsē līdz viršanai, lai palīdzētu pilnībā izšķīst. Šķīdināšanas procesa laikā barotne bieži tiek sajaukta.

Sterilizē autoklāvā 15 mārciņas spiediena un 121 ° C temperatūrā 15 minūtes. Izņem no autoklāvas un ļauj nostāvēties, līdz vidēja temperatūra sasniedz aptuveni 45 līdz 50 ° C. Pievieno 20 ml iepriekš pagatavota kālija tellurīta šķīduma līdz 1%..

Sajauc un ielej sterilos Petri trauciņos. Ļaujiet sacietēt un kārtot apgrieztā veidā, lai vēlāk tos uzglabātu ledusskapī.

Sagatavotās barotnes galīgajam pH jābūt 7,2 ± 0,2.

Pirms parauga stādīšanas pagaidiet, līdz plāksne ņem apkārtējo temperatūru.

Sagatavotās barotnes krāsa ir sarkana.

Izmantot

Lai gan to var izmantot izolācijai S. aureus jebkura veida paraugos to galvenokārt izmanto farmaceitisko produktu, kosmētikas un pārtikas mikrobioloģiskajai analīzei.

Ieteicams, lai inokulāts būtu blīvs. Sēšanu var veikt ar platīna rokturi vai ar virsmu ar Drigalski lāpstiņu.

Plāksnes inkubē 35-37 ° C temperatūrā 24 līdz 48 stundas aerobioze.

Kvalitātes kontrole

Lai veiktu Vogel-Johnson vides kvalitātes kontroli, var izmantot šādus kontroles celmus:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 vai Proteus mirabilis ATCC 43071.

Paredzamais rezultāts ir šāds:. \ T S. aureus Apmierinoša augšana ar melnām kolonijām, ko ieskauj dzeltena barotne. Uz S. epidermidis regulāra augšana ar caurspīdīgām vai melnām kolonijām, ko ieskauj sarkana vide.

Tāpat arī E. coli ir sagaidāms, ka būs pilnīga inhibīcija, un Proteus mirabilis daļēja vai pilnīga inhibīcija; ja tā aug, tā to darīs taupīgi, un kolonijas būs melnas, ko ieskauj vidēja sarkana krāsa.

Atsauces

1. BD laboratorijas. VJ (Vogels un Džonsons Agars). 2006. Pieejams: bd.com
2. Laboratories Britania. Vogel-Johnson Agar. 2015. Pieejams: britanialab.com
3. Laboratories Britania. Kālija tellurs. 2015. Pieejams: britania.com
4. Himedia Laboratory. Vogel-Johnson Agar Medium. 2018. Pieejams: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. Vogel-Johnson Agar bāze. Merck mikrobioloģijas rokasgrāmata. 12. izdevums, pp. 502-503. Pieejams: Lietotāji / Komandas / Lejupielādes
6. Wikipédia dalībnieki, "Ágar Vogel Jonhson", Wikipédia uz enciklopēdisko dzīvi,   disponível em: wikipedia.org.
7. Venecuēlas standarts Covenin 1292-89. (1989). Pārtika Izolēšana un skaitīšana Staphylococcus aureus. Pieejams:sencamer.gob.ve