Gaiši zaļa agara pamatne, sagatavošana un izmantošana



The gaiši zaļš agars tā ir cieta barotne ar augstu selektivitātes pakāpi. To lieto tikai Salmonella ģints celmu izolēšanai, tomēr ir daži izņēmumi, piemēram, tīfu un paratifu sugas, kas šajā vidē nepaliek.

Salmonellas ģints meklējumi ir bieži sastopami fekāliju, ūdens vai pārtikas paraugos. Šajā ziņā šis medijs var būt ļoti noderīgs. Šo agaru 1925. gadā izveidoja Kristensens, Lesters un Džurgens, vēlāk pārveidojis Kauffmann.

Tā sastāv no pluripeptoniem no dzīvnieku audu virskārtas gremošanas un kazeīna gremošanas, satur arī rauga ekstraktu, nātrija hlorīdu, laktozi, saharozi, fenola sarkanu, spilgti zaļu un agara agaru.

To raksturo tas, ka tas ir ļoti nevēlams plašsaziņas līdzeklis vairumam baktēriju, veicinot salmonellas augšanu, tomēr dažas koliformas spēj tajā uzturēties, vāji attīstoties.

Ir svarīgi uzsvērt, ka šajā vidē Shigella ģints nepalielinās un arī nav Salmonella typhimurium, ni Salmonella paratyphi. Tāpēc, ja vēlams izolēt šos mikroorganismus, jāizmanto citi līdzekļi, piemēram, XLD agars..

Indekss

  • 1 Fonds
    • 1.1 Spilgti zaļš agars
    • 1.2 Spilgti zaļā agara (BGA) varianti
  • 2 Sagatavošana
  • 3 Lietojumi / lietojumi
  • 4 Kvalitātes kontrole
  • 5 Atsauces

Fonds

Spilgti zaļš agars

Katrai no sastāvdaļām, kas veido vidi, ir īpaša funkcija, kas nosaka agara īpašības un īpašības.

Pluripeptonas un rauga ekstrakts ir barības vielu avots, no kura mikroorganismi uzņem to attīstībai nepieciešamo slāpekli un minerālvielas. Laktoze un saharoze ir enerģijas avoti mikroorganismiem, kas spēj tos fermentēt.

Spilgti zaļš ir inhibējošā viela, kas novērš grampozitīvu baktēriju un lielu skaitu gramnegatīvu mikroorganismu veidošanos.

Nātrija hlorīds nodrošina osmotisko stabilitāti vidē. Lai gan fenola sarkans ir pH rādītājs, tas kļūst par krāsu, kad konstatē skābju veidošanos no ogļhidrātu fermentācijas.

Neapkalpojošas laktozes un saharozes kolonijas aug baltā krāsā, rozā vai caurspīdīgā vidē uz sarkana fona. Piemēram, Salmonella ģints baktērijas.

Lai gan laktozes fermentācijas baktērijas vai saharoze, kas spēj augt šajā barotnē, attīstās zaļgani dzeltenas vai zaļgani dzeltenas kolonijas uz dzeltenzaļas fona. Piemēram,, Escherichia coli un Klebsiella pneumoniae.

Spilgti zaļā agara (BGA) varianti

Ir citi spilgti zaļā agara varianti; novobiocīna zaļais agara glikozes (NBG) un novobiocīna agara gaiši zaļais glicerīna laktozes (NBGL).

Novobiocīna agara gaiši zaļā glikoze (NBG)

Satur triptāzes sojas agaru, dzelzs amonija citrātu, nātrija tiosulfāta pentahidrātu, fenola sarkanu, glikozi, spilgti zaļu, novobiocīnu un destilētu ūdeni..

Kalpo Salmonella koloniju izolēšanai no izkārnījumiem.

Šajā gadījumā spilgti zaļš un novobiocīns ir inhibējošās vielas, kas novērš grampozitīvu baktēriju un dažu gramnegatīvu mikroorganismu augšanu..

Nātrija tiosulfāts ir sēra avots un dzelzs citrāts ir dzelzs avots, kas ir vajadzīgs, lai atklātu ūdeņraža sulfīda ražošanu, veidojot melno dzelzs sulfīda nogulsnes..

Glikoze ir fermentējamais ogļhidrāts, un fenola sarkans ir pH indikators.

Šajā vidē Salmonella kolonijas attīstās lielā mērā ar melnu centru, ko ieskauj sarkanīga halo un kam seko skaidri redzama zona. Daži. \ T Citrobacter freundii ražot kolonijas, kas ir identiskas Salmonella.

Spilgti zaļš novobiocīna agara glicerīna laktoze (NBGL)

Šajā barotnē ir triptāzes sojas agars, dzelzs amonija citrāts, nātrija tiosulfāts, laktoze, glicerīns, spilgti zaļš, novobiocīns un destilēts ūdens..

Šīs barotnes atšķirība ar iepriekšējo ir tā, ka glikozi aizstāj ar laktozi, un glicerīns un fenola sarkans netiek izmantoti.

Šo barotni izmanto arī salmonellu sugu izolēšanai, kolonijas attīstās melnā veidā, ražojot ūdeņraža sulfīdu.

Tikai kolonijas, kas neražo skābi no glicerīna vai laktozes, iegūst H ražošanu2Tas ir pietiekami, jo zemais pH traucē H veidošanos2S. Tas rada bezkrāsainas kolonijas vairumam Proteus un Citrobacter sugu.

Sagatavošana

-Nosver 58 g komerciāli iegūtas dehidrētas vides. Pievienojiet to litrā dubultu destilēta ūdens. Sajauc, ļaujiet nostāvēties dažas minūtes un sagatavo preparātu siltuma avotam, līdz tas pilnībā izšķīst.

-Autoklāvs 121 ° C temperatūrā 15 minūtes nepārsniedz sterilizācijas laiku.

-Ļaujiet stāvēt un kalpot pat karstiem sterilos Petri trauciņos. Galīgajam pH jābūt 6,9 ± 0,2.

-Ļaujiet sacietēt un uzglabāt ledusskapī līdz lietošanai. Pirms stādīšanas plāksnēm jābūt istabas temperatūrai.

-Pulvera barotne ir zaļā krāsā un ir gatava lietot oranža-brūnu vai sarkanīgi zaļu krāsu atkarībā no pH un komerciālās mājas. Ļoti brūna krāsa norāda, ka agars ir pārkarsēts.

-Kad agars ir sacietējis, nav ieteicams pārstrādāt, jo barotne pasliktinās.

Lietojumi / lietojumi

Šo barotni izmanto, lai meklētu Salmonella ģints celmus, cita starpā, no izkārnījumiem un piena produktiem..

Tā kā tā ir diezgan neiespējama vide, ieteicams stādīt lielu daudzumu inokulāta, ja izmanto tiešo paraugu. Pretējā gadījumā pirms sēklām šajā vidē jāveic paraugu iepriekšēja bagātināšana un bagātināšana.

Tā kā daži salmonellas celmi ir nomākti vai aug ar grūtībām, ir ieteicams šo barotni papildināt ar citiem selektīviem agariem Salmonella..

Visai kolonijai ar raksturīgo salmonellu ir jāveic bioķīmiskie testi, lai noteiktu galīgo identifikāciju.

Kvalitātes kontrole

Lai pārbaudītu spilgti zaļā agara barotnes labu darbību, ATCC celmus var izmantot, lai novērotu tās attīstību..

Visbiežāk izmantotie celmi, ko izmanto kvalitātes kontrolei, ir: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

Pirmajām 3 jāsniedz rozā vai caurspīdīgas baltas kolonijas uz sarkana fona. Salmonella ar labu attīstību un Proteus ar retu vai regulāru augšanu.

Klebsiella un Escherichia ir paredzētas dzeltenīgi dzeltenas kolonijas ar dzeltenu fonu, un Shigella un Staphylococcus gadījumā tās jāaizliedz..

Dehidrētā vide jāglabā istabas temperatūrā, sausā vietā, jo vide ir ļoti higroskopiska.

Atsauces

  1. Difco Francisco Soria Melguizo laboratorija S.A. Brilliant Green Agar. 2009. gads
  2. Britu laboratorija Spilgti zaļais agars. 2015. gads.
  3. BD laboratorija. BD Brilliant Green Agar. 2013. gads.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobioloģiskā diagnoze. (5. izdevums). Argentīna, Redakcijas Panamericana S.A..
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott mikrobioloģiskā diagnoze. 12 ed. Argentīna Panamericana S.A Redaktors