Agar Salmonella-Shigella pamats, sagatavošana un izmantošana

The Salmonella-Shigella agars pazīstams arī kā SS agars, tas ir vidēji selektīvs un diferenciāls līdzeklis, kas īpaši izstrādāts, lai izolētu Salmonella un Shigella ģints enteropatogēnās baktērijas no vides un klīniskajiem paraugiem..

SS agaram ir sarežģīts sastāvs; Tas sastāv no gaļas ekstrakta, peptona, laktozes, žults sāļiem, nātrija citrāta, nātrija tiosulfāta, dzelzs citrāta, agara, neitrāla sarkana, spilgti zaļa un destilēta ūdens. Ņemot vērā tā lielo selektivitāti, ir iespējams audzēt paraugus ar bagātīgu jauktu floru.

Mikrobioloģijas laboratorijās Salmonella-Shigella barotni plaši izmanto, lai izpētītu Salmonella un Shigella klātbūtni caurejas izkārnījumu, notekūdeņu, dzeramā ūdens un pārtikas paraugos..

Dažkārt ir nepieciešams izmantot pirms bagātināšanas buljonus (laktozes buljonu) un bagātināšanu (selenīta cistīna buljonu), lai atgūtu Salmonella celmus..

Šie pasākumi ir nepieciešami, ja ir aizdomas par salmonellas eksistenci ļoti mazā daudzumā vai ja celms var tikt nepareizi izturēts ar procesiem, kas raksturīgi rūpnieciskai ražošanai, galvenokārt pārstrādātiem pārtikas produktiem. Ieteicams arī bagātināt izkārnījumu paraugus no pacientiem, kuri ir ārstēti ar antibiotikām.

Pēc tam bagātināto buljonu var sēt uz Salmonella-Shigella agara un citiem līdzīgiem materiāliem, piemēram, ksilozes agaru, deoksisiloksāna lizīnu (XLD) un enterālo Hektoen agaru (HE).

Indekss

• 1 Fonds
  • 1.1. Uzturvērtība
  • 1.2 Konsekvence
  • 1.3. Selektīva
  • 1.4 Diferenciālis
• 2 Sagatavošana
• 3 Lietošana
• 4 Ierobežojumi
• 5 Kvalitātes kontrole
• 6 Atsauces

Fonds

Katrai Salmonella-Shigella barotnes sastāvdaļai ir īpaša funkcija, un maisījums kopumā dod tai raksturīgās īpašības..

Barojoša jauda

Gaļas ekstrakts un peptons (digestēts kazeīns un dzīvnieku audi) nodrošina vajadzīgās uzturvielas (nitrogēnus, oglekli un vitamīnus) mikroorganismu attīstībai, kas spēj pieļaut pārējās sastāvdaļas..

Konsekvence

Agara agars ir atbildīgs par to, lai nodrošinātu vidēju konsistenci.

Selektīvs

Šis barotne ir ļoti selektīva, jo tā satur žults sāļus, nātrija citrātu un spilgti zaļu. Tādēļ tas kavē visu Gram-pozitīvo baktēriju un lielāko daļu gramnegatīvo bacīļu, tostarp dažu koliformu, augšanu..

Lai gan Salmonella ģints baktērijas un daži Shigella celmi atbalsta šos savienojumus.

Galvenokārt Salmonella ģints ir ļoti izturīga pret žults sāļiem, lai viņi spētu dzīvot žultspūšā dažiem nesēju pacientiem, kuri pastāvīgi izspiež baktērijas caur izkārnījumiem.

Diferenciālis

Laktoze ir fermentējams ogļhidrāts, kas palīdz diferencēt laktozes fermentācijas celmus no nefermentējošiem celmiem. Šo īpašību apliecina pH indikatora klātbūtne, kas šajā vidē ir fenola sarkana.

Laktozes fermentācijas celmi nodrošina sarkanas kolonijas, bet nefermentējošie celmi ir bezkrāsaini. Šī īpašība ir svarīga, jo Salmonella un Shigella fermentē laktozi.

No otras puses, šī barotne satur sēra un dzelzs citrāta avotu kā nātrija tiosulfātu kā dzelzs avotu. Abi savienojumi spēj diferencēt baktērijas, kas spēj ražot sērūdeņradi. Tie reaģē, veidojot melnā nešķīstoša un redzama dzelzs sulfīda nogulsnes.

Šajā īpašumā ir daži Salmonella ģints celmi. Parasti to kolonijas ir bezkrāsainas, ar melnu punktu tās centrā. Pārējie Salmonellas produkti neražo H₂S un attīstās kā bezkrāsainas kolonijas.

No otras puses, Shigella ģints kolonijas ir bezkrāsainas, bez melnēšanas.

Sagatavošana

Tas ir ļoti vienkārši sagatavojams.

Nosver 63 g dehidrētas komerciālas barotnes un izšķīdina vienā litrā destilēta ūdens. Sildiet šķīdumu un samaisiet. Maisījums var sasniegt vārīšanās temperatūru līdz minūtēm.

Šis nesējs nedrīkst būt autoklāvs. Pēc izšķīdināšanas tas tiek pasniegts tieši uz vienu vai divām sterilām plāksnēm.

Sablīvējot, tie ir novietoti apgrieztā veidā plāksnes veidotājos un tiek uzglabāti ledusskapī (2-8 ° C), līdz tie tiek izmantoti.

Pēc sagatavošanas barotnei jābūt pH 7,2 ± 0,2 un oranžai sarkanai.

Pirms paraugu sēšanas ir svarīgi atlaidināt plāksnes. Jūs varat tieši sēklas oriģinālo paraugu, izvadot materiālu uz agara daļas un pēc tam no tā izplūstot.

Bagātinātu buljonu lietošanas gadījumā iziet daļu selenīta buljona un sēj ar drigalski lāpstiņu.

Inkubējiet 37 ° C temperatūrā 24 stundas aerobiozi.

Paturiet prātā, ka gramu svars un vidējais barotnes pH var atšķirties dažādās tirdzniecības vietās. Vidēja pamatplāksne vienmēr norāda tās sagatavošanas indikācijas.

Izmantot

To bieži lieto izkārnījumu kultūru analīzē un atlikušo ūdens paraugu, dzeramā ūdens un pārtikas mikrobioloģiskajā pētījumā.

Bieži tiek sagatavotas dubultplāksnes, vienā pusē novietots Salmonella-Shigella agars un otrā pusē XLD agars..

Ierobežojumi

-Daži Shigella celmi šajā vidē nepalielinās. Tādēļ tas nav ieteicams šīs ģints primārajai izolācijai.

-Ne visas skaidras kolonijas ar melnu centru liecina par Salmonella; jāveic bioķīmiskie testi, lai noteiktu pareizu identifikāciju, jo dažu Proteus celmu kolonijas nav atšķirīgas no salmonellas kolonijām..

-Dehidrētā vidē jābūt uzmanīgai, ja tā ir ļoti higroskopiska. Tāpēc tas jāglabā sausā un labi noslēgtā vidē. Atvērts ļoti īsu laiku.

-Laika gaitā žults sāļi vidē var nogulsnēties, veidojot attēlu, kas ir līdzīgs matam ar agaru, bet tas neietekmē rezultātus.

-Daži Shigella celmi var lēnām fermentēt laktozi.

Kvalitātes kontrole

Lai pierādītu, ka medijs darbojas pareizi, ieteicams apzināt zināmus vai sertificētus kontroles celmus un novērot, vai augšana atbilst paredzamajām īpašībām.

Šim nolūkam -. \ T E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium o Enterococcus faecalis.

Gaidāmie rezultāti ir:

Escherichia coli --rozā izliektas kolonijas.

Enterobacter un Klebsiella- lielām kolonijām un sarkanai vai rozā gļotādai.

Shigella flexneri --dzidras vai bezkrāsainas plakanas kolonijas.

Salmonella typhimurium - bezkrāsainas kolonijas ar melnu centru.

Enterococcus faecalis-- pilnīga inhibīcija.

Atsauces

1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agars. 2009. Pieejams: f-soria.es
2. BD laboratorija. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Pieejams: bd.com
3. Laboratories Britania. Salmonella-Shigella agars. 2015. Pieejams: britanialab.com
4. Valtek diagnostika. Salmonellas-šigella agars (SS Agar) .2010. Pieejams: andinamedica.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobioloģiskā diagnoze. 12 ed. Redakcijas Panamericana S.A. Argentīna.
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobioloģiskā diagnoze. 5. izdevums Redakcijas Panamericana S.A. Argentīna.