Agara sāls un manitols, sagatavošana un izmantošana



The sāls agars un mannīts vai sāļš mannīts ir cieta, selektīva un diferenciāla barotne. To radīja Chapman, lai izolētu patogēnus gram-pozitīvus kokus, īpaši Staphylococcus aureus.

Tomēr ir lietderīgi arī izolēt Staphylococcus epidermidis, kas dažkārt var būt kā oportūnistisks patogēns, un. \ t Staphylococcus saprophyticus, citās sugās.

Daži Enterococcus ir spējīgi augt šajā vidē, kā arī dažos Gram-pozitīvos sporas veidojošos bacilos.

Šī barotne ir ļoti noderīga klīnisko paraugu analīzei, bet to izmanto arī pārtikas produktu mikrobioloģiskajā pētījumā un citu rūpniecisko produktu, piemēram, kosmētikas līdzekļu, kvalitātes kontrolē..

Sālīts mannīta agars sastāv no liellopu gaļas, tripteīna, mannīta, nātrija hlorīda, fenola sarkanā un agara ekstraktiem un peptoniem..

Indekss

  • 1 Fonds
  • 2 Sagatavošana
  • 3 Lietojumi
  • 4 Kvalitātes kontrole
  • 5 Galīgie apsvērumi
  • 6 Atsauces

Fonds

Manitola agars ir selektīvs, pateicoties augstajai sāls koncentrācijai. Sāļums darbojas kā inhibējoša viela un novērš gramnegatīvu baktēriju augšanu.

Tas ir arī diferencēts mannīta ogļhidrāta un fenola sarkanā pH indikatora klātbūtnes dēļ. No tā baktērijas, kas spēj fermentēt mannītu, ražo skābes, paskābina vidi, pagriežot kolonijas un vidēji dzelteno.

No otras puses, kolonijas, kas nesaudzē mannītu, aug vidē, ņemot barības vielas, ko nodrošina gaļas ekstrakti un peptons, un tripteína. No turienes baktērijas ekstrahē oglekli, slāpekli, vitamīnus un minerālvielas, kas nepieciešamas to augšanai.

Šajā gadījumā kolonijas var būt vājas vai spēcīgas rozā, un barotne paliek tāda pati vai mainās fuksija.

Agars ir viela, kas nodrošina konsistenci vidē.

Sagatavošana

Lai pagatavotu vienu litru sālīta mannīta agara, nosver 111 g dehidratētā barotnes komerciālajā ēkā un izšķīdina 1000 ml destilēta ūdens, izmantojot fiolu..

Siltums tiek izmantots, bieži novēršot barotni, lai uzlabotu šķīdināšanas procesu. Ļaujiet tai vārīties vienu minūti.

Novietojiet fiolu autoklāvā 121 ° C temperatūrā 15 minūtes.

Laika beigās fols tiek izņemts no autoklāvas, atstāts stāvēt un kalpo no 15 līdz 20 ml uz steriliem Petri trauciņiem, ja temperatūra ir aptuveni 50 līdz 55 ° C..

Ir atļauts sacietēt, pasūtot apgrieztā formā plaqueros un turot ledusskapī līdz tā lietošanai. Pirms parauga stādīšanas jāgaida, līdz plāksne ņem apkārtējās vides temperatūru.

Plāksnes sēj ar striju vai sējas uz virsmas ar drigalski lāpstiņu. Sagatavotās barotnes galīgajam pH jābūt 7,4 ± 0,2

Dehidrētās vides krāsa ir gaiši bēša un sagatavotās barotnes krāsa ir oranža sarkana.

Lietojumi

Tā kā tas ir ļoti selektīvs, tas ir ideāli piemērots tādu paraugu stādīšanai, kuros ir jaukta flora, kurā vēlas meklēt klātbūtni Staphylococcus aureus, kā šīs ģints galvenais patogēns.

Šajā ziņā viens no tās biežākajiem lietojumiem ir faringālu eksudātu paraugu un deguna izdalīšanās mikrobioloģiskā analīze, īpaši, lai atklātu asimptomātiskos nesējus. S. aureus.

Dažas valstis šo analīzi ir īstenojušas kā obligātu prasību cilvēkiem, kuri vēlas strādāt kā pārtikas pārdevēji.

Šī kontrole neļauj pieņemt darbā cilvēkus, kas ir S. aureus, tādējādi izvairoties no milzīgas saindēšanās ar pārtiku, pārtikā, kas ir piesārņota ar stafilokoku enterotoksīnu.

To var iekļaut arī brūču infekciju, asins kultūru, CSF, bronhokalveolārā skalošanai, cita starpā..

Sālīts mannīta agars ir noderīgs, lai no jauna izolētu urīna kultūru kolonijas no CLED agara vai asins agara, kura grami ir atklājuši Gram-pozitīvus kokus klasteros.

Tas attiecas arī uz pārtikas, dzeramā ūdens, augsnes mikrobioloģisko analīzi, cita starpā.

Kvalitātes kontrole

Pēc tam, kad ir sagatavota plašu partija ar sālītu mannīta agaru, ieteicams veikt kvalitātes kontroli. Kontroles celmi tiek apsēti, lai parādītu, vai ir augšana vai nē.

Kā pozitīvu kontroli, zināmi Staphylococcus aureus. Tam ir jābūt apmierinoši augam, attīstot dzeltenas kolonijas, un arī barotne kļūst par tādu pašu krāsu.

Tāpat ir ērti iekļaut zināmu celmu Staphylococcus epidermidis. Tam ir jābūt apmierinošam, attīstot rozā kolonijas, un barotne paliek tādā pašā krāsā vai tumšāka stiprākā rozā krāsā.

Kā negatīva kontrole tiek izmantoti celmi, kam nevajadzētu augt šajā barotnē. Piemēram, jūs varat stādīt zināmu celmu Escherichia coli vai Klebsiella pneumoniae. Paredzamais rezultāts ir pilnīga inhibīcija, tas ir, nav pieaugums.

Turklāt inkubējot plāksni bez inokulācijas. Tajā nedrīkst būt izaugsme, krāsu maiņa.

Ir svarīgi, lai plāksnīte netiktu izmantota, ja ir pazīmes, kas liecina par pasliktināšanos, piemēram, piesārņojumu, dehidratāciju, krāsas maiņu..

Galīgie apsvērumi

Lietojot sālītu mannīta agara barotni, jāņem vērā daži svarīgi aspekti:

-Dzeltenās koloniju augšanas iegūšana nenorāda, ka tā ir Staphylococcus aureus. Jāatceras, ka daži Enterococcus celmi spēj augt šajā barotnē un fermentēt mannītu, kā arī dažus gram-pozitīvus sporas veidojošos bacilus..

Tāpēc ir svarīgi veikt koloniju un katalāzes testu gramam.

-No otras puses, ir jāņem vērā, ka citas Staphylococcus sugas atšķiras no aureus Tās spēj arī fermentēt mannītu. Tādēļ ir svarīgi, lai kolonija tiktu kultivēta uz barības vielu buljonu, no kura no tās ņemt un veikt koagulāzes testu..

Stafilokoku sugas, kam klīniski nozīmīga ir cilvēka fermentācija, ir: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, cita starpā.

Citi var sniegt mainīgu reakciju, tas ir, dažreiz pozitīvu un dažreiz negatīvu. Daži ir S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, cita starpā.

-Lai veiktu koagulāzes testu, kolonijas nav ieteicams lietot tieši no mannīta agara, jo barotnes augstā sāls koncentrācija var ietekmēt rezultātu.

-Visbeidzot, ieteicams inkubēt ar sālītu mannītu iesūktu plāksnes līdz 48 stundām, jo ​​dažiem celmiem S. aureus Tās var lēnām fermentēt mannītu, lai gan tas nav ļoti bieži.

Atsauces

  1. Laboratories Britania. Mannīta sāls agars. 2015. Pieejams: britanialab.com
  2. "Sālīts mannīta agars". Vikipēdija, brīvā enciklopēdija. 2018. gada 31. oktobris, 19:08 UTC. Janvāris 17, 2019, 20:55, pieejams: en.wikipedia.org.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobioloģiskā diagnoze. (5. izdevums). Argentīna, Redakcijas Panamericana S.A..
  4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobioloģiskā diagnoze. 12 ed. Argentīna Panamericana S.A Redaktors
  5. BD laboratorijas BD Mannitol Salt Agar. 2013. Pieejams: bd.com.