MacConkey Agar pamati, sagatavošana un izmantošana



The MacConkey agars Tā ir cieta barotne, kas ļauj ekskluzīvi izolēt gramnegatīvos bacilus. Šī iemesla dēļ tā ir selektīva vide un ļauj atšķirt laktozes fermentācijas un nefermentējošās bacīles, kas padara to par diferenciālu vidi. Tā ir viena no visplašāk izmantotajām barotnēm mikrobioloģijas laboratorijā.

Šo barotni galvenokārt izmanto ģimenei piederošo gramnegatīvo bacīļu izolēšanai Enterobaktērijas, ieskaitot oportūnistiskas un enteropatogēnas sugas.

To var izmantot arī, lai izdalītu citas zarnās baktērijas, kas dzīvo kuņģa-zarnu traktā, bet nepieder Enterobaktērijas, kā Aeromonas sp, Plesiomonas sp, cita starpā.

Visbeidzot, tā var izolēt citus gramnegatīvus, nefermentējošus glikozes bacilus, kas atrodami vidē, ūdenī vai augsnē, bet kas dažkārt var būt oportūnistiski patogēni, piemēram, Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkaline sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, cita starpā.

Indekss

  • 1 Fonds
    • 1.1 MacConkey agars
  • 2 Sagatavošana
  • 3 Parastā MacConkey agara izmantošana
  • 4 Citi MacConkey agara varianti
    • 4.1. MacConkey agars ar sorbītu
    • 4.2. MacConkey agars bez kristāla violeta vai sāls
    • 4.3. MacConkey agars ar cefoperazonu
    • 4.4. MacConkey Agar, kas sagatavots ar 10% jūras ūdens v / v
  • 5 Atsauces

Fonds

MacConkey Agar

Šī materiāla pamatu var izskaidrot ar tās sastāvdaļu aprakstu, jo katram no tiem ir mērķis, kas nosaka tā īpašību.

Žults sāļi un violets kristāls

Šajā ziņā MacConkey agaram ir sarežģīts sastāvs. Pirmkārt, tas satur žults sāļus un violetu kristālu.

Šie elementi ir atbildīgi par Gram-pozitīvo baktēriju un dažu Gram-negatīvo bacīļu augšanas kavēšanu. Savukārt tas veicina gramnegatīvu bacīļu attīstību, ko šīs vielas neietekmē. Tāpēc tā ir selektīva vide.

Tiek apgalvots, ka tas ir nedaudz selektīvs salīdzinājumā ar citiem medijiem, kas arī kavē grampozitīvu baktēriju un arī lielāko gramnegatīvo baktēriju augšanu.

Tas ir ļoti selektīvs attiecībā uz konkrētu ģinti, piemēram, TCBS agaru izolācijai Vibrio cholerae un citas līdzīgas halofīlas un alkalofīlas sugas.

Peptoni, polipononi un laktoze

Satur vielas, kas nodrošina nepieciešamos barības elementus mikroorganismiem, kas attīstās šajā vidē, piemēram, peptonus, polipononus un laktozi.

Laktoze ir galvenais elements, lai vidēja viela būtu diferencēta vide, jo mikroorganismi, kas spēj fermentēt laktozi, veidos spēcīgas rozā kolonijas..

Dažas baktērijas var lēnām vai vāji fermentēt laktozi, attīstot bāli rozā kolonijas un saglabājot pozitīvu laktozi.

Tie, kas nemodulē laktozi, izmanto kā enerģijas avotu peptonus, kas ražo amonjaku, sārmaina vidi. Tāpēc kolonijas, kas radušās, ir bezkrāsainas vai caurspīdīgas.

PH indikators

Krāsu maiņa tiek panākta ar citu būtisku savienojumu, kurā ir MacConkey agars. Šis savienojums ir pH indikators, kas šajā gadījumā ir neitrāls sarkans.

Laktozes fermentācija rada jaukto skābju veidošanos. Tie skābumu vidē pH zem 6,8..

Tas izraisa pH indikatora virzīšanos uz intensīvu rozā nokrāsu. Krāsas intensitāte var mainīties atkarībā no galīgā pH.

Destilēts ūdens, nātrija hlorīds un agars

No otras puses, tas satur destilētu ūdeni un nātrija hlorīdu, kas nodrošina hidratāciju un osmotisko līdzsvaru vidē. Visbeidzot, vidē ir agars, kas ir pamats, kas nodrošina konsistenci cietā vidē.

Sagatavotajam MacConkey agara barotnes gala pH jāpielāgo līdz 7,1 ± 0,2..

Sagatavošana

Vienam litram MacConkey agara jānosver 50 g dehidrētas barotnes, tad ievieto fiolā un izšķīdina vienā litrā destilēta ūdens. Pēc 10 minūšu atpūtas tas tiek sildīts, pastāvīgi sajaucot, līdz tas vārās 1 minūti.

Tad ievietojiet fiolu autoklāvā un sterilizējiet 121 ° C temperatūrā 20 minūtes. Laika beigās tas tiek noņemts no autoklāvas un ļauj atdzist līdz 45 ° C temperatūrai, pēc tam tiek pasniegts sterilos Petri trauciņos laminārā plūsmas pārsegā vai Bunsen degļa priekšā..

Ļaujiet sacietēt un uzglabāt plāksnītes turētājā apgrieztā un ledusskapī 2-8 ° C temperatūrā līdz lietošanai.

Lai iegūtu MacConkey agaru, kas inhibē Proteus ģints radīto uzliesmošanas efektu, tiek izmantots mazs sāls MacConkey agars..

Parastā MacConkey agara izmantošana

MacConkey agars ir iekļauts visās kultūras barotnēs, kas sakārtotas laboratorijā saņemto klīnisko paraugu sēšanai. Tas ir noderīgs arī pārtikas mikrobioloģijā un vides mikrobioloģijā.

Šajā vidē augošie gramnegatīvo bacīļu daudzveidība izsaka fenotipiskas īpašības, kas palīdz noteikt attiecīgo sugu diagnozi. Piemēram, koloniju lielums, krāsa, konsistence un smarža ir dažas no pazīmēm, kas var palīdzēt.

Šajā vidē sugas Escherichia coli, Klebsiella sp un Enterobacter sp ražo spēcīgas rozā kolonijas, ko ieskauj nogulsnēta žults teritorija.

Tik daudz baktēriju kā Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp un Hafnia sp tie var parādīties bez krāsas pēc 24 stundām vai gaiši rozā 24-48 stundu laikā.

Tāpat Proteus, Edwadsiella, Salmonella un Shigella ģints ražo bezkrāsainas vai caurspīdīgas kolonijas..

Citi MacConkey agara varianti

Ir arī citi MacConkey agara varianti, kuriem ir specifiski mērķi. Tālāk tie ir minēti:

MacConkey agars ar sorbītu

Šis barotnes mērķis bija atšķirt enteropatogēnu celmu (Escherichia coli enterohemorrhagic O157: H7) Escherichia coli.

Šī barotne maina ogļhidrātu laktozi sorbitolam. Celmu celmi. \ T E. coli enterohemorāģiskais O157: H7 atšķiras no pārējās, jo tās nesaudzē sorbītu un tādēļ iegūst caurspīdīgas kolonijas, tomēr pārējie celmi E. coli ja tās fermentē sorbītu un kolonijas ir spēcīgas rozā.

MacConkey agars bez kristāla violeta vai sāls

Šis agars daudz atšķiras no klasiskā MacConkey agara, jo tam nav kristāla violeta, Gram-pozitīvās baktērijas var augt.

No otras puses, sāls trūkums kavē dažu enterālo baktēriju, piemēram, ģints, radīto agaru rašanos. Proteus, un tādējādi atvieglo visu klātesošo baktēriju, tostarp Gram-pozitīvo baktēriju, izolāciju.

MacConkey agars ar cefoperazonu

Šis MacConkey agara variants sākotnēji tika izolēts Laribacter hongkongensis un vēlāk viņi saprata, ka tas ir noderīgs, lai izolētu Arcobacter butzleri. AAbas ir nedaudz izliektas negatīvas grambacīles, kas ir izturīgas pret cefoperazonu.

Šīs baktērijas nesen ir saistītas kā gastroenterīta un caurejas cēloņi, kas iegūti Āzijas un Eiropas indivīdos, parādoties kā diviem spēcīgiem jauniem patogēniem..

Antibiotika ļauj inhibēt pievienoto kuņģa-zarnu trakta floru, kas veicina šo baktēriju attīstību, novēršot to nepamanīšanu, jo tiem nepieciešama 72 stundu augšana.

MacConkey Agar sagatavots ar 10% jūras ūdens v / v

Šis variants ir noderīgs fekāliju piesārņojuma baktēriju veselības rādītāju novērtēšanai, ieskaitot kopējo koliformu un izkārnījumu koliformas atpūtas sāļu ūdeņos (pludmalēs un līčos)..

Cortez et al. 2013 parādīja, ka šādā veidā sagatavotā vide ievērojami palielina šo mikroorganismu atgūšanos sāls vidē, salīdzinot ar MacConkey agara lietošanu, kas sagatavots ar destilētu ūdeni..

Tas ir tāpēc, ka modificētā vide stimulē baktēriju augšanu, kas ir fizioloģiski mierīgā stāvoklī, "dzīvotspējīgi, bet ne kultivējami", tāpēc tie nav atgūstami parastos medijos..

Atsauces

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Cefoperazona MacConkey agara izmantošana, lai selektīvi izolētu Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
  2. "MacConkey Agar". Vikipēdija, brīvā enciklopēdija. 4 Apr 2018, 18:16 UTC. 2018. gada 29. decembris, 15:22 en.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobioloģiskā diagnoze. 12 ed. Argentīna Panamericana S.A Redaktors.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobioloģiskā diagnoze. (5. izdevums). Argentīna, Redakcijas Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Ar jūras ūdeni sagatavotas barotnes ietekme uz veselības rādītājiem jūras ūdeņos Chichiriviche spa, Falcón stāvoklis, Venecuēla. Rev Soc Come Microbiol 2013. gads; 33: 122-128
  6. Garsija P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktiskā klīniskā mikrobioloģija. Kadisas Universitāte, 2. izdevums. UCA publikāciju dienests.