Cetrimida agara pamati, sagatavošana, izmantošana



The cetrimīda agars vai cetrimīds ir selektīva cieta barotne, kas paredzēta izolācijai Pseudomonas aeruginosa. Tā pamatā ir šīs sugas raksturīgo pigmentu ražošana, un tā tika izstrādāta no Kinga, Varda un Ranejas radītajiem tehniskajiem agariem..

Sākotnējā formula satur magnija hlorīda sāļus, kālija sulfātu, aizkuņģa dziedzera želatīnu un agara agaru. Formulas modifikācija sastāvēja no cetrimīda (cetiltrimetilamonija bromīda) un glicerīna pievienošanas..

Cetrimīda agars ir noderīgs paraugu mikrobioloģiskai izpētei, ja ir klātbūtne Pseudomonas aeruginosa. Jāatzīmē, ka šī baktērija ir ļoti svarīga, jo, lai gan tā ir daļa no parastās vides mikrobiotas, tā bieži darbojas kā oportūnistisks patogēns..

Tāpēc viena no visbiežāk sastopamajām problēmām, ko izraisa šī dīgļa, ir hospitalizētas infekcijas, tas ir, tās, kas notiek slimnīcas vidē, uzbrūkot pacientiem, kuriem ir nomākta imūnsistēma..

No otras puses, sakarā ar afinitāti, ka šis mikroorganisms ir ar mitrumu, visneaizsargātākie piesārņojuma mērķi ir: elpošanas palīglīdzekļi, zāles, smidzinātāji, ūdens avoti, gaisa kondicionieri, dezinfekcijas līdzekļi, ziepju šķīdumi, injicējami šķīdumi, atvērtas brūces , katetri, urīna katetri, cita starpā.

Šajā ziņā cetrimīda agars ir noderīgs, lai veiktu mikrobioloģiskās kontroles un kultūras iepriekš nosauktajiem elementiem.

Indekss

  • 1 Fonds
    • 1.1. Mutiskā tulkošana
  • 2 Sagatavošana
  • 3 Lietojumi
  • 4 Sēž
  • 5 Ierobežojumi
  • 6 Kvalitātes kontrole
  • 7 Atsauces

Fonds

Cetrimīda agars ir balstīts uz barotnes spēju veicināt augšanu P. aeruginosa, stimulē to pigmentu veidošanos un, savukārt, kavē citu mikroorganismu augšanu.

Šīs īpašības ir saistītas ar funkciju, ko katra tā sastāvdaļa izpilda. Piedāvātais želatīna peptons kalpo kā slāpekļa, vitamīnu un minerālvielu avots. Glicerīns vai glicerīns darbojas kā oglekļa avots.

Savukārt cetrimīds (cetiltrimetilamonija bromīds) ir viela, kas kavē citu baktēriju augšanu nekā P. aeruginosa, ieskaitot citas sugas, kas pieder pie vienas ģints.

Inhibēšana notiek tāpēc, ka cetramīds darbojas kā katjonu mazgāšanas līdzeklis, destabilizējot lielāko baktēriju plazmas membrānu, izņemot P. aeruginosa un daži citi, kas spēj izdzīvot.

No otras puses, tas satur magnija hlorīdu un kālija sulfātu. Šie savienojumi stimulē fenotipisko izpausmi, kas saistīta ar Pseudomonas aeruginosa dažādi pigmenti, to vidū: pirocianīns, pioverdin, piorubīns, piomelanīns un fluoresceīns. Visbeidzot, tajā ir agara agars, kas nodrošina cietu konsistenci.

Mutiskā tulkošana

Šajā agārā iegūtā auguma interpretācija tiek veikta šādi:

Aplūkojot apaļas, gludas kolonijas ar regulārām malām, kas rada zilzaļganu, zaļu, brūnu vai sarkanīgu pigmentu, kā arī augļu smaržas emisiju (aminoacetofenons), ir šīs baktērijas klātbūtnes rezultāts minētajā paraugā..

No otras puses, tas liecina par P. aeruginosa spilgti dzeltenīgi zaļa pigmenta novērošana kolonijās, ja plāksne ir pakļauta ultravioletajai gaismai.

Jāatzīmē, ka katra novērotā krāsa ir saistīta ar konkrēta pigmenta ražošanu. Zilzaļais pigments atbilst pirocianīna ražošanai, zaļš līdz pioverdinam, sarkanais līdz piorrubīnam, brūns līdz piomelanīnam un spilgti dzeltenīgi zaļš fluorescence ultravioletajā gaismā līdz fluoresceīnam..

Sagatavošana

Nosver 43 g dehidrētās vides un izšķīdina destilētā ūdenī. Pievieno 10 ml glicerīna. Paņemiet maisījumu uz siltuma avotu. Ļaujiet vārīties dažas minūtes, līdz tas pilnībā izšķīst.

Autoklāvs 121 ° C temperatūrā 15 minūtes. Ļaujiet stāvēt un pasniegt sterilos Petri trauciņos, ja temperatūra ir aptuveni 50 ° C.

Ļaujiet sacietēt, invertēt, sakārtot pēc kārtas un uzglabāt ledusskapī līdz lietošanai. Lai stādītu cetrimīda agara plāksnes, tās iepriekš jāizņem no ledusskapja un jāļauj istabas temperatūrai..

Barotnes galīgajam pH jābūt 7,2 ± 0,2.

Dehidrētās vides krāsa ir bēša un preparāts ir necaurspīdīgs balts.

Lietojumi

Cetrimīda agars var tikt izmantots visu veidu paraugu stādīšanai, kuros ir Pseudomonas aeruginosa. Tādēļ tas ir noderīgs visās mikrobioloģijas jomās (vides, rūpnieciskās, klīniskās, ūdens un pārtikas)..

Ir ļoti svarīgi analizēt slimnīcu vidi un tādējādi izmantot korektīvās mediācijas, jo šis mikroorganisms sasniedz pacientus ar aprīkojumu, medikamentiem, šķīdumiem un inficētām piegādēm, ko lieto pacients..

Šādā veidā mikroorganisms var inficēt imūnsupresētu pacientu apakšējos elpceļus, urīnceļus un brūces..

Var veikt arī koloniju skaitu P. aeruginosa mikrobu ierobežojumu testos.

Sēta

Cetrimīda agaru var izmantot kā primāro kultūru. Plāksne ir inokulēta vienā no tās malām, un no turienes tā tiek izkliedēta uz pārējo plāksni. Šķidros paraugus var sēt uz virsmas ar drigalski lāpstiņu.

Plates inkubē aerobiozi 37 ° C temperatūrā 24 stundas inkubācijas laikā.

Ierobežojumi

-Neliels procents. \ T  Pseudomonas aeruginosa nerada pirocianīnu, tāpēc jūs varat interpretēt nepatiesu negatīvu.

-Šajā vidē tiek inhibētas dažas klīniski nozīmīgas Pseudomonas sugas.

-Neskatoties uz aprakstītajām īpašībām Pseudomonas aeruginosa, tie ir jāapstiprina ar papildu identifikācijas testiem. Tests, kam nevajadzētu būt, ir oksidāzes tests, tam jābūt pozitīvam.

-Daži enterobaktērijas var augt šajā vidē un attīstīties dzeltenam pigmentam, bet tas atšķiras no Pseudomonas aeruginosa kurā, novietojot plāksni ultravioleto gaismu, nav fluorescences.

-Serratia marcescens izdodas attīstīt un ražot rozā pigmentu.

-Ja plāksnītes, kas iesētas ar cetrimīda agaru, uz laiku tiek pakļautas istabas temperatūrai, tad celmus. \ T P. aeruginosa tie var zaudēt ultravioletajā gaismā novēroto fluorescenci, tomēr īpašums tiek atgūts, ja to atkārtoti inkubē 37 ° C temperatūrā..

Kvalitātes kontrole

Lai pārbaudītu cetrimīda agara pareizu darbību, var izmantot kontroles celmus, piemēram: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 un Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Gaidāmie rezultāti ir:

  • Uz P. aeruginosa labs augums, ar zili-zaļganu pigmentu un pozitīvu fluoresceīnu.
  • S. maltofilija un S. aureus būs daļēji vai pilnīgi inhibēts.
  • Paredzams, ka Escherichia coli pilnībā jāaizliedz.

Atsauces

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Fenotipiskais un seroloģiskais raksturojums klīniskajiem izolātiem no Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Laboratorijas Conda Pronadisa. Cetrimīda agara bāze. 2014. Pieejams: condalab.com
  3. Laboratories Britania. Cetrimida agars. 2015. Pieejams: britanialab.com
  4. BD laboratorijas BD Pseudosel agars (Cetrimīda agars). 2013. Pieejams: bd.com
  5. Francisco Soria Melguizo Laboratory, C.A. Cetrimīda agars. 2009. Pieejams: http://f-soria.es