Nepelometrija, ko tā veido un izmanto



The nefelometrija sastāv no daļiņu (šķīdumā vai suspensijā) radītā starojuma mērīšanas, tādējādi mērot izkaisītā starojuma jaudu citā leņķī nekā negadījuma starojuma virziens..

Ja daļiņu suspensijā sasniedz gaismas staru kūlis, ir daļa no atstarotās gaismas, cita daļa tiek absorbēta, cita daļa tiek novirzīta un pārējā daļa tiek pārraidīta. Tāpēc, kad gaisma nonāk caurspīdīgā vidē, kurā ir cietu daļiņu suspensija, suspensiju novēro duļķainā veidā.

Indekss

  • 1 Kas ir nefelometrija??
    • 1.1. Radiācijas dispersija ar daļiņām šķīdumā
    • 1.2. Nepelometrs
    • 1.3 Novirzes
    • 1.4. Metroloģiskie raksturlielumi
  • 2 Pieteikumi
    • 2.1 Imūnkompleksu noteikšana
    • 2.2 Citi lietojumi
  • 3 Atsauces

Kas ir nefelometrija??

Radiācijas dispersija ar daļiņām šķīdumā

Tajā brīdī, kad gaismas staru kūlis nokļūst suspendētā vielas daļiņās, gaismas virziena virziens mainās. Šis efekts ir atkarīgs no šādiem aspektiem:

1.Daļiņu izmēri (izmērs un forma).

2. Suspensijas raksturojums (koncentrācija).

3. Viļņa garums un gaismas intensitāte.

4. Izejošās gaismas attālums.

5. Noteikšanas leņķis.

6. Vidēja atstarošanas indekss.

Nepelometrs

Nefrometrs ir instruments, ko izmanto, lai mērītu daļiņas, kas suspendētas šķidrā paraugā vai gāzē. Tātad fotoelements, kas novietots 90 ° leņķī attiecībā pret gaismas avotu, nosaka suspensijā esošo daļiņu starojumu.

Arī gaismas daļiņas, ko atstaro daļiņas pret fotoceli, ir atkarīgas no daļiņu blīvuma. 1. diagrammā ir parādīti pamatelementi, kas veido nefrometru:

A. Radiācijas avots

Neelometrijā ir ārkārtīgi svarīgi, lai starojuma avots būtu ar augstu gaismas jaudu. Ir dažādi veidi, sākot no ksenona lampām un dzīvsudraba tvaika lampām, volframa halogēnspuldzēm, lāzera starojuma, cita starpā.

B. Monohromatora sistēma

Šī sistēma atrodas starp starojuma avotu un kivi, lai tādējādi izvairītos no radiācijas ar dažādiem viļņu garumiem kuvēšanā, salīdzinot ar vēlamo starojumu..

Pretējā gadījumā fluorescences reakcijas vai siltuma efekti šķīdumā radītu novirzes no mērījuma.

C. Lasīšanas kivete

Tas ir parasti prizmatisks vai cilindrisks konteiners, un tam var būt dažādi izmēri. Šajā ir pētījuma risinājums.

D. Detektors

Detektors atrodas noteiktā attālumā (parasti tas ir ļoti tuvu tvertnei) un ir atbildīgs par radiācijas izkliedēšanu, ko izkliedē suspensijas daļiņas..

E. Lasīšanas sistēma

Parasti tā ir elektroniska iekārta, kas saņem, pārveido un apstrādā datus, kas šajā gadījumā ir veiktie pētījumi.

Novirzes

Katram mērījumam tiek piemērota kļūdas procentuālā daļa, ko galvenokārt sniedz:

Piesārņoti spaiņi: kivetēs jebkurš līdzeklis ārpus šķīduma, kas atrodas iekšpusē vai ārpus tās, samazina starojuma gaismu uz detektora ceļa (bojātas kivetes, putekļi, kas piestiprināti pie kivetes sienām).

Traucējumi: dažu mikrobu piesārņotāju vai duļķainuma klātbūtne izstaro starojuma enerģiju, palielinot dispersijas intensitāti.

Fluorescējošie savienojumi: tie ir savienojumi, kas, ierosinot starojumu, izraisa kļūdainu un lielu dispersijas blīvuma rādījumu.

Reaģentu saglabāšana: nepietiekama sistēmas temperatūra var radīt pētījumam nelabvēlīgus apstākļus un rosināt duļķainus reaģentus vai nogulsnes..

Elektroenerģijas svārstības: lai izvairītos no avārijas radītā starojuma avota, sprieguma stabilizatoriem ieteicams izmantot vienādu starojumu.

Metroloģiskie raksturlielumi

Tā kā konstatētās radiācijas starojuma jauda ir tieši proporcionāla daļiņu masas koncentrācijai, nefelometriskie pētījumi teorētiski ir augstāki par metroloģisko jutību nekā citas līdzīgas metodes (piemēram, turbidimetrija)..

Turklāt šai metodei ir vajadzīgi atšķaidīti šķīdumi. Tas ļauj samazināt absorbcijas un atstarošanas parādības.

Programmas

Nefelometriskie pētījumi klīniskajās laboratorijās ieņem ļoti svarīgu vietu. Pielietojums var būt no imūnglobulīnu un akūtas fāzes, komplementa un koagulācijas proteīnu noteikšanas.

Imūnkompleksu noteikšana

Ja bioloģiskais paraugs satur interesējošo antigēnu, to sajauc (buferšķīdumā) ar antivielu, lai izveidotu imūnkompleksu.

Nepelometrija mēra gaismas daudzumu, ko izkliedē antigēna-antivielu reakcija (Ag-Ac), un tādējādi tiek konstatēti imūnkompleksi.

Šo pētījumu var veikt ar divām metodēm:

Nefelometrija gala punktā:

Šo metodi var izmantot, lai analizētu parametru, kurā pētāmā bioloģiskā parauga antivielas tiek inkubētas divdesmit četras stundas..

Ag-Ac kompleksu mēra, izmantojot nefrometru, un izkliedētās gaismas daudzumu salīdzina ar to pašu mērījumu, kas veikts pirms kompleksa veidošanās..

Kinētiskā nefelometrija

Šajā metodē nepārtraukti tiek kontrolēta kompleksa veidošanās ātrums. Reakcijas ātrums ir atkarīgs no antigēna koncentrācijas paraugā. Šeit mērījumi tiek veikti kā laika funkcija, tāpēc pirmais mērījums tiek veikts laikā "nulle" (t = 0).

Kinetiskā nefelometrija ir visbiežāk izmantotā metode, jo pētījumu var veikt 1 stundas laikā, salīdzinot ar ilgu laika perioda beigu metodi. Dispersijas attiecību mēra tieši pēc reaģenta pievienošanas.

Tāpēc, kamēr reaģents ir nemainīgs, klātbūtnes antigēna daudzumu uzskata par samērīgu ar izmaiņu ātrumu.

Citas programmas

Nepelometriju parasti izmanto ūdens ķīmiskās kvalitātes analīzē, lai noteiktu skaidrību un kontrolētu tā apstrādes procesus.

To izmanto arī, lai izmērītu gaisa piesārņojumu, kurā daļiņu koncentrācija tiek noteikta pēc izkliedētās gaismas dispersijas..

Atsauces

  1. Britannica, E. (s.f.). Nepelometrija un turbidimetrija. Atgūts no britannica.com
  2. Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetrija un nepelometrija. Izgūti no pdfs.semanticscholar.org
  3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Atgūts no tehnochemical.com
  4. Morais, I. V. (2006). Turbidimetriskā un nepelometriskā plūsmas analīze. Izgūti no repositorio.ucp.p
  5. Sasson, S. (2014). Nefelometrijas un turbidimetrijas principi. Izgūti no notesonimmunology.files.wordpress.com
  6. Stanley, J. (2002). Imunoloģijas un seroloģijas pamati. Albany, NY: Thompson Learning. Izgūti no books.google.co.ve
  7. Vikipēdija. (s.f.). Nepelometrija (zāles). Izgūti no en.wikipedia.org