Kopīgot:
Kromatogramma tam, kas tas ir un kas ir
The hromatogramma ir divdimensiju grafiskais ieraksts, kas iegūts absorbējošā vidē, kas parāda vielu atdalīšanu ar hromatogrāfiju. Hromatogrammā veidojas redzams paraugs, virsotnes vai plankumi, kas atspoguļo maisījuma sastāvdaļu fizisko atdalīšanu.
Apakšējais skaitlis ir hromatogramma ar trim smailēm, A, B un C, no trīs parauga komponentiem, kas atdalīti ar hromatogrāfiju. Tiek novērots, ka katram no trim virsotnēm ir atšķirīgs augstums un atrašanās vieta hromatogrammas laika asij.
Ordinātu vai Y ass ieraksta informāciju par signāla stiprumu (šajā gadījumā milivoltos mV). Atzīmē reģistru, atkarībā no detektora, kādas vielas vai atsevišķas maisījuma sastāvdaļas fiziskās īpašības.
Pīķa augstums ir proporcionāls parauga atdalītās komponentes koncentrācijai optimālā sistēmā. Tādējādi, piemēram, ir viegli vizualizēt, ka B komponents ir lielāks nekā A un C.
Uz abscisa vai X ass attēlo parauga vai maisījuma komponentu aiztures laiku. Tas ir laiks, kas pagājis no parauga injicēšanas līdz tā apstāšanās brīdim, un katram tīram saturam ir atšķirīgs.
Indekss
- 1 Kāda ir hromatogramma??
- 1.1 Vielu identifikācija
- 1.2 Vielu tīrības klasifikācija
- 1.3 Vielu kvantitatīva noteikšana
- 2 veidi
- 2.1. Kromatogrammas uz papīra vai plānas plēves
- 2.2 Detektoru radītās hromatogrammas
- 3 Atsauces
Kas ir hromatogramma??
Tas ir visa hromatogrāfijas procesa galīgais ieraksts. No tā iegūst analītiski svarīgus parametrus. To var iegūt kā elektronisku failu, izdrukātu histogrammu vai procesa atbalstu; piemēram, uz papīra.
Y asi ģenerē signāla detektori vai reakcijas intensitāte, piemēram, spektrofotometri. Nepieciešama optimāla laika analīze, iegūto virsotņu vai plankumu raksturojums; cita starpā, izmērs, atrašanās vieta, krāsa.
Hromatogrammu analīzēm parasti nepieciešama kontrole vai standarti, identiskas vielas un zināmā koncentrācija. Šo pārbaužu analīze ļauj noteikt, salīdzinot ar pārbaudāmā parauga komponentiem raksturīgajiem paraugiem.
Hromatogrammā var novērot un analizēt, kā tika veikta maisījuma sastāvdaļu atdalīšana. Tās optimālais pētījums ļauj identificēt vielu, lai pierādītu tās tīrību, lai kvantitatīvi noteiktu maisījumā esošo vielu daudzumu, cita starpā.
Iegūtā informācija var būt kvalitatīva; piemēram, kad vielas ir identificētas un to tīrība ir noteikta. Kvantitatīvā informācija ir saistīta ar maisījuma komponentu skaita noteikšanu un atdalītās analīta koncentrāciju.
Vielu identifikācija
Analizējot hromatogrammas rezultātus, var identificēt dažādas vielas, salīdzinot aiztures laikus ar zināmajām vielām. To var novērot, ja pētāmās vielas pārvietojas tādā pašā attālumā, ja tām ir vienāds laiks ar zināmajām vielām.
Piemēram, hromatogramma ļauj atklāt un identificēt urīnā esošos narkotiku metabolītus, piemēram, stimulantus un steroīdus. Tas ir svarīgs atbalsts, lai pētītu un pētītu dažus metabolītus, ko rada jaundzimušo ģenētiskie traucējumi.
Hromatogramma atvieglo dzeramajā ūdenī esošo halogenēto ogļūdeņražu atklāšanu starp citām vielām. Tas ir nepieciešams kvalitātes kontroles laboratorijas analīzē, jo tas ļauj atklāt un identificēt dažādos produktos esošos piesārņotājus..
Vielu tīrības klasifikācija
Hromatogrammā var atšķirt tīras un netīrās vielas. Tīra viela hromatogrammā radītu vienu pīķi; bet nešķīstoša viela radītu divus vai vairākus maksimumus.
Pienācīgi pielāgojot apstākļus, kādos veic hromatogrāfiju, var novērst divu vielu veidošanos vienā pīķī.
Vielu kvantitatīva noteikšana
Analizējot hromatogrammas virsotņu laukumu, var aprēķināt parauga komponentu koncentrāciju.
Tāpēc pīķa laukums ir proporcionāls paraugā esošās vielas daudzumam. Šos kvantitatīvos datus iegūst ļoti jutīgās sistēmās, piemēram, tādās, kas rada gāzes vai šķidruma hromatogrāfijas.
Veidi
Viena no hromatogrammu klasifikācijām ir cieši saistīta ar dažādiem hromatogrāfijas veidiem, kas rada atbilstošu hromatogrammu.
Atkarībā no izpildes apstākļiem detektoriem, cita starpā, hromatogramma atšķirsies atkarībā no tā satura un kvalitātes.
Hromatogrammas uz papīra vai plānas plēves
Hromatogrammu var ģenerēt tieši uz papīra vai plānas plēves, tieši uzrādot parauga sastāvdaļu sadalījumu vai sadalījumu.
Tas ir ļoti noderīgi, lai atdalītu un pētītu krāsainas vielas ar dabīgiem pigmentiem, piemēram, hlorofilu. To var pakļaut attīstības procesiem, ja vielām nav dabiskas krāsas, un tas ir noderīgs kvalitatīviem pētījumiem.
Hromatogrammas, ko rada detektori
Hromatogrammu var iegūt arī, izmantojot detektoru, kas reģistrē hromatogrāfijas reakciju, izvadi vai galīgo signālu. Kā minēts iepriekš, šis detektors parasti ir spektrofotometrs, masas spektrometrs, automātiskie sekvenceri, elektrokemijas..
Hromatogrammas, kas rodas kolonnās, neatkarīgi no tā, vai tās ir gāzes vai šķidrumi, kā arī augstas izšķirtspējas plānās kārtās, izmanto detektorus..
Atkarībā no detektora veida hromatogrammu var klasificēt kā diferenciālu vai integrālu, atkarībā no detektora reakcijas veida..
Diferenciālā hromatogramma
Diferenciālais detektors nepārtraukti mēra hromatogrammas reakcijas signālu, savukārt integrētie detektori kumulatīvi mēra atbilstošo signālu.
Diferenciālā hromatogramma ir hromatogramma, ko iegūst ar diferenciālo detektoru. Šo detektoru vidū var minēt, piemēram, spektrofotometrus un elektriskās vadītspējas izmaiņu detektorus.
Šis hromatogrammas veids ir parādījis anjonu atdalīšanas rezultātu no parauga, kas konstatēts ar netiešo fotometriju. Tādi paši rezultāti ir iegūti, piemēram, jonu pētīšanai ar galīgo detektēšanu ar konduktometriju.
Augšējais grafiks parāda diferenciālkromatogrammas piemēru, kas iegūts ar automātiskiem DNS sekvenceriem (deoksiribonukleīnskābe). Diagramma skaidri parāda četru krāsu pīķus, vienu krāsu katrai DNS slāpekļa bāzei.
Izmantojot datorizētu programmu, tiek veicināta analizēto DNS bāzu secību interpretācija, kā arī sarežģītāki analīti..
Visaptveroša hromatogramma
Integrālā hromatogramma atbilst tai, ko iegūst ar integrētu detektoru. Šajā hromatogrammā tiek pierādīta viena pētāmā komponenta izeja. Pīķi netiek iegūti kā diferenciālam.
Integrālajā hromatogrammā iegūst ierakstu ar formu, kas aprakstīta kā solis. Šī forma ir hromatogrammas daļa, kas atbilst vienas vielas daudzumam, kas atstāj kolonnu.
Atsauces
- Bhanot, D. (2013). Kā lasīt uz hromatogrammu? Saturs iegūts no: lab-training.com
- Carey, F. A. (2006). Organiskās ķīmijas sestais izdevums. Mc Graw kalns
- Kromatogrāfija šodien. (2014). Kas ir hromatogramma? Saturs iegūts no: chromatographytoday.com
- Mathias, J. (2018). Iesācēja ceļvedis: kā interpretēt gāzu hromatogrāfijas masas spektrometrijas rezultātus. Saturs iegūts no: innovatechlabs.com
- Spāņu hromatogrāfijas biedrība. (2014). Hromatogramma. Atgūts no: secyta.es
- Vikipēdija. (2019). Papīra hromatogrāfija. Saturs iegūts no: wikipedia.org